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　　由动物或植物的可食或非可食部分直接提取或由传统选育或经基因重组技术得到的微生物包括

　　但不限于细菌放线菌真菌菌种发酵提取后或再经进一步纯化制剂化等工艺制得的可含有一个

　　为酶制剂产品的活性保存流通贮存标准化使用等目的而加入的食品原料和食品添加剂

　　利用物理和或化学的方法将酶固定于载体上在食品生产过程中以不可溶解状态发挥作用的产

　　4.1.1用于生产酶制剂的原辅料应符合相关要求在规定的使用条件下不应对最终食品产生有害健

　　对微生物生产菌种应进行分类学和或遗传学的鉴定并应符合食品安全国家标准食品添

　　加剂使用标准GB2760及相关公告菌种的保藏方法和条件应保证发酵批次之间的稳定性和可重

　　4.1.5为了酶制剂产品的活性保存流通贮存和标准化使用商品化的酶制剂允许加入必要的辅料成

　　分酶制剂用辅料不应在最终食品中发挥功能作用一般按生产需要适量使用在达到预期的目的下尽

　　固定化酶制剂所使用的固定化载体应符合食品安全国家标准食品接触材料及制品用添加剂

　　使用标准》()、《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》()或其他在食品中允许使

　　注部分酶制剂的酶活力测定参考方法参见附录B企业可按相应标准中给出的或企业规定的方法测定

　　微生物限量应符合表的规定其中经基因重组技术得到的微生物生产的酶制剂不应检出生

　　微生物来源的酶制剂不应检出抗菌活性抗菌活性按食品安全国家标准食品微生物学检验微

　　注合适的各种食品原料作为酶制剂用辅料不在本表列出所用食品原料需符合相应的标准

　　本方法适用于用分光光度计测定乙酰乳酸脱羧酶制剂中乙酰乳酸脱羧酶的酶活力本方法

　　乙偶姻在贮存时易形成二聚体从而影响试验结果但若遵循配制步骤中所述的措施去预防本方

　　乙酰乳酸脱羧酶与底物乙酰乳酸反应脱羧生成乙偶姻乙偶姻在碱性条件下与萘酚和肌酸的

　　混合物反应生成红色产物通过在522nm下测定溶液的吸光度可以从乙偶姻标准曲线上得出反应

　　烧杯中用约4.5L水溶解然后加入15%的聚氧化乙烯十二烷基醚溶液7.60mL搅拌均匀用约

　　量瓶中用约1molL的氢氧化钠溶液溶解并定容该溶液使用前配制配制时需避光并且冰浴

　　B.2.3.3.5乙偶姻储备液1.000L取一定量的乙偶姻于试管中在37℃恒温箱中溶解然后将试

　　管置于冰水中使乙偶姻重结晶重结晶后乙偶姻不含有影响试验结果的乙偶姻二聚体可用于储备液

　　的配制称取重结晶后的乙偶姻0.100g精确至0.0001g移入100mL容量瓶中用水溶解并定容

　　注乙偶姻对热不稳定且容易吸潮因此需放置在干燥器中冷藏2℃~6℃保存如发现物质有明显的吸潮现

　　B.2.3.3.6乙偶姻标准溶液用乙偶姻储备液和水按照表B.2稀释而成该溶液应每天配制

　　个试管中加入显色剂4.60mL用涡旋振荡器充分混合均匀室温下反应40.0min后使用分光光度

　　从样品中称取一定量的样品精确至0.0005g用溶液稀释其稀释的倍数要使样品的最终吸光

　　水浴中的10mL试管里然后加入底物200.0L立即计时并用涡旋振荡器充分混匀迅速放回水浴

　　中反应20.0min后依次向试管中加入显色剂4.60mL用涡旋振荡器充分混匀置于室温重新开

　　始计时反应40.0min后使用分光光度计在522nm波长下测定各管溶液的吸光度同时用缓冲液

　　试验结果以平行测定结果的算术平均值为准在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差

　　本方法适用于用全自动生化分析仪测定乙酰乳酸脱羧酶制剂中乙酰乳酸脱羧酶的酶活力。

　　乙偶姻在贮存时易形成二聚体从而影响试验结果但若遵循配制步骤中所述的措施去预防本方

　　乙酰乳酸脱羧酶与底物乙酰乳酸反应脱羧生成乙偶姻乙偶姻在碱性条件下与萘酚和肌酸的

　　混合物反应生成红色产物通过在510nm波长下测定标准溶液的吸光度绘制出标准曲线对照标准

　　B.2.4.4.1.1全自动生化分析仪要求带有进样系统搅拌系统温度控制系统30℃±0.2℃和检测系

　　统检测系统要求可在510nm波长处用动力学法检测吸光度变化时间间隔最少18s