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山东轻工业学院硕士学位论文 I 摘 要 纤维素酶是一种重要的酶产品, 主要由外切β-葡聚糖酶、 内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成, 还有很高的木聚糖酶活力。 生物和化学抗性非常强的天然纤维素大分子可以在这三类酶共同水解的作用下, 降解成为结构简单的葡萄糖分子。这对于缓解当前全世界所面临的粮食、 能源以及环境等方面的问题具有非常重要的作用。 目前, 限制纤维素酶广泛应用的原因主要是纤维素酶产生菌的产酶能力比较低, 且所产酶系的组分不平衡。 人们针对纤维素酶菌株工业化生产规模中存在的这些实际问题进行了多方面的努力, 但是一直未...
山东轻工业学院硕士学位论文 I 摘 要 纤维素酶是一种重要的酶产品, 主要由外切-葡聚糖酶、 内切-葡聚糖酶和-葡萄糖苷酶等组成, 还有很高的木聚糖酶活力。 生物和化学抗性非常强的天米乐登录入口然纤维素大分子可以在这三类酶共同水解的作用下, 降解成为结构简单的葡萄糖分子。这对于缓解当前全世界所面临的粮食、 能源以及环境等方面的问题具有非常重要的作用。 目前, 限制纤维素酶广泛应用的原因主要是纤维素酶产生菌的产酶能力比较低, 且所产酶系的组分不平衡。 人们针对纤维素酶菌株工业化生产规模中存在的这些实际问题进行了多方面的努力, 但是一直未取得突破性进展。 我们的研究以本实验室筛选得到的里氏木霉YZ-68为研究对象, 分别从诱变选育高产菌株、 优化发酵培养基、 优化发酵条件三方面进行了研究和讨论。 首先通过紫外、 微波、 亚硝酸钠及亚硝基胍复合诱变得到一株高产纤维素酶菌株, 将其命名为里氏木霉NTG-84。 传代试验证明菌株遗传特性稳定。 之后在摇瓶中采用单因素试验对菌株的发酵培养基进行优化, 尤其对纤维素酶发酵产生非常重要影响的碳源、 氮源、 初始pH进行了研究。 优化后培养基的组成为: 麸皮2%;微晶纤维素8%; 蛋白胨3%; (NH4) 2SO4 0.2%; MgSO47H2O 0.15%; KH2PO4 2%;吐温-80 1 mL/L, 初始pH 5.5。 摇瓶装液量为80 mL/米乐登录入口500 mL, 接种量为5%, 发酵时间为120 h, 发酵温度为30 ℃。 利用10 L自动控制发酵罐进行NTG-84的放大试验, 装液量6.5 L, 初始的搅拌速度为200 r/min, 发酵初始通气率1.5 vvm, 发酵24 h后根据发酵罐中的溶氧情况对搅拌速度和通气率予以调节, 使溶氧维持于20%以上。 同时, 对碳源微晶纤维素采用流加的方法进行添加, 30 ℃发酵培养120 h后其滤纸酶活达到72.98 IU/mL。 关键词: 纤维素酶; 诱变育种; 发酵
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